重组过敏原蛋白：新一代过敏原检测核心试剂

过敏性疾病包括哪些过敏性疾病如特异性皮炎、食物过敏、过敏性鼻炎、哮喘、荨麻疹等发病率逐年提高已经成为影响人类健康的主要疾病之一。处理不及时可能会危及生命已成为公共卫生关注的热点是六大慢性疾病之一。据世界变态反应组织WAO统计近30年间过敏性疾病的发生率至少增加了3倍目前全球总患病率已达20%以上其中70%的过敏患者为儿童。过敏原检测方法有哪些导致过敏反应的过敏原广泛存在于我们周围的环境中例如尘螨、花粉、食物和动物的毛发等。对过敏性疾病的诊疗首先需要明确引起过敏反应的物质这就需要采取有效精准的检测方法。体内检测包括皮肤点刺实验SPT、真皮内皮肤试验IST、激发试验等。体内检测实验是目前过敏原检测的“金标准”但因其有创、检测种类受限、测试前需停药、且存在强烈致敏的风险限制了其在临床上的广泛应用。体外检测随着科技的进步基于免疫印迹、磁微粒化学发光、免疫荧光等体外检测方法的广泛应用已有多种体外检测技术获得应用。目前临床主要开展的体外过敏原检测是检测过敏原特异性IgE抗体包括总IgE检测、特异性IgE检测、IgG/IgG4检测、嗜碱性粒细胞脱颗粒检测。经过多年的发展体外检测具有无创、适用范围广、不受药物和皮肤状态影响、检测种类多、可量化、准确性高等优点。过敏原特异性IgE检测特异性IgE检测是过敏性疾病精准诊断的方向可更准确的指导过敏治疗。过敏原特异性IgE检测可以明确致敏成分、提示过敏风险、有助于鉴别交叉致敏、提高诊断准确性精准治疗过敏性疾病。以户尘螨致敏为例户尘螨中主要过敏原为Der p 1、 Der p 2和Der p 23次要过敏原有Der p 5等。研究发现患有哮喘的尘螨过敏者与患有鼻炎的尘螨过敏者相比主要致敏原和次要致敏原的特异性IgE水平均更高这说明过敏原可以提示过敏反应的风险高低。户尘螨中还存在一种交叉反应过敏原Der p 10,它与虾蟹中的原肌球蛋白序列高度相似所以当患者出现Der p 10 组分阳性时也提示可能存在对虾蟹过敏。在明确户尘螨过敏原组分后根据检测结果可筛选适合的治疗方案例如Der p 1 和/或 Der p 2特异性IgE阳性的患者免疫治疗效果更好。过敏原检测核心原料知多少精准的体外诊断方法离不开核心试剂的支撑。目前在过敏原检测方法中使用的核心原料有天然过敏原提取物、天然纯化的过敏原组分以及重组表达的过敏原组分。重组过敏原正在被越来越多的体外诊断公司采用以提高过敏原组分检测的精准性。天然过敏原提取物1. 天然过敏原提取物中过敏原的含量及活性存在较大差异。2. 天然过敏原提取物是混合物成分复杂难鉴定出患者对哪种过敏原过敏无法进行个体化诊疗。3. 某些过敏原组分含量较低作为诊断原料易导致结果假阴性。天然纯化的过敏原提取物天然纯化的过敏原对粗提物中的有效过敏原组分进行纯化但由于受限于原材料的属性不易放大存在较大批间差异并可能含有其他过敏原组分正逐渐被重组过敏原替代。重组过敏原重组过敏原是利用原核或真核表达系统通过基因工程技术表达的重组过敏原组分蛋白。重组抗原能够以天然过敏原类似的方式结合IgE抗体并且具有其他过敏原检测原料不具备的优点被越来越多的公司使用以替代其他类别的原料产品。重组过敏原优势如下纯度高更特异纯度更高更可控不存在非特异过敏原污染批间一致性高过敏原组分特异蛋白的含量及成分明确可有效控制批间差异易于放大生产成本可控可通过工艺放大获得大量特异蛋白不受天然提取物含量及材料的限制成本可控【参考文献】1. Chen H, et al. China Consensus Document on Allergy Diagnostics. Allergy Asthma Immunol Res. 20212. Brunetto, et al. Characterization and comparison of commercially available mite extracts for in vivo diagnosis. Allergy. 20103. 毛杰等.过敏原检测方法的研究进展.中国预防医学杂志2021.