兔抗FANCI抗体亲和纯化，IP-WB全流程兼容设计，一站式解决FANCI蛋白分析功能

产品概述由艾美捷Bethyl Laboratories推出的FANCI抗体货号A301-254A是一款针对人源范可尼贫血互补组I蛋白FANCI的兔多克隆抗体经抗原亲和纯化以未偶联完整IgG形式提供。该抗体特异性识别人源FANCI蛋白适用于免疫印迹及免疫沉淀检测为DNA双链断裂修复及染色体稳定性维持机制研究提供可靠工具。核心规格参数参数 详细信息靶标 FANCI范可尼贫血互补组I蛋白反应性 人类宿主 兔克隆性 多克隆免疫原 第1025–1075位氨基酸区域抗体形式 完整IgG同型 IgG偶联物 未偶联纯度 抗原亲和纯化抗原种属 人类浓度 200 µg/ml缓冲液 Tris缓冲盐水含0.1% BSA及0.09%叠氮化钠储存条件 2–8 °C保质期 到货后1年免疫原与特异性验证A301-254A抗体采用固相载体上固定的FANCI特异性表位进行亲和纯化。该抗体识别的表位位于人FANCI蛋白的第1025至1075位氨基酸之间参考编号NP_060663.2GeneID 55215。免疫球蛋白浓度依据比尔定律测定1 mg/mL IgG在A280波长处的吸光度为1.4。特异性验证要点免疫原区域位于蛋白C端附近1025–1075 aa该区域在FANCI同源物中具有较强特异性经抗原亲和纯化显著降低非特异性交叉反应尤其避免与FANCD2等其他FA家族蛋白的交叉识别建议使用FANCI敲除细胞裂解液作为阴性对照验证特异性应用方法与推荐工作浓度免疫印迹WB推荐稀释范围1:2,000 – 1:10,000实验方案要点封闭液及抗体稀释液含5%脱脂牛奶的TBST一抗孵育条件4°C孵育过夜推荐细胞裂解液检测使用山羊抗兔IgG重链轻链抗体货号A120-101P作为二抗免疫沉淀物检测使用兔IgG轻链特异性HRP二抗并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清货号S100-020以降低背景 功能性提示FANCI在细胞中表达水平相对较低建议使用富集了染色质结合组分的裂解液或同步化至S/G2期的细胞样本以提高检测灵敏度。免疫沉淀IP推荐用量6 µg 抗体 / mg 细胞裂解物操作注意事项裂解缓冲液推荐使用含150–300 mM NaCl的非变性裂解液如NP-40或Triton X-100缓冲液以保留蛋白复合物完整性裂解液中必须添加蛋白酶抑制剂如PMSF、蛋白酶抑制剂混合物及磷酸酶抑制剂抗体与裂解物共孵育4°C旋转孵育2小时至过夜使用Protein A/G磁珠或琼脂糖珠捕获免疫复合物洗脱后建议使用轻链特异性二抗进行WB检测避免重链信号干扰复合物共沉淀FANCI通常与FANCD2形成异源二聚体I-D复合物在IP-FANCI后可用WB检测FANCD2的共沉淀以验证复合物完整性。靶点生物学背景FANCIFANCI范可尼贫血互补组I蛋白是范可尼贫血FA通路的核心成员之一。FA通路是一种专门的DNA链间交联修复机制对维持基因组稳定性至关重要。核心功能1. DNA链间交联修复FANCI与FANCD2形成异源二聚体I-D复合物在DNA损伤后被单泛素化激活定位于染色质上的DNA损伤位点募集下游修复因子如FAN1、BRCA1、BRCA2/FANCD1等通过同源重组或转损伤合成途径修复交联损伤。2. 染色体稳定性维持FANCI参与DNA双链断裂修复及复制叉停滞后的重启过程。FA通路功能缺失直接导致染色体脆性增加及自发染色体断裂。3. 复制叉保护FANCI-FANCD2复合物在复制压力下保护新生DNA链免受过度降解。临床关联FANCI基因突变导致范可尼贫血互补组I这是一种常染色体隐性遗传病特征包括进行性骨髓衰竭全血细胞减少、先天性畸形如拇指畸形、皮肤色素沉着、身材矮小、以及极高的癌症易感性尤其是急性髓系白血病和头颈部鳞癌。FANCI在肿瘤细胞中常出现异常表达可能影响化疗药物尤其是DNA交联剂如丝裂霉素C、顺铂的耐药性。蛋白特征分子量约150 kDa结构域包含N端核定位信号、与FANCD2相互作用的区域以及C端泛素化修饰位点储存与稳定性指南储存温度2–8°C请勿冷冻。反复冻融会导致抗体聚集及活性下降。防腐剂0.09%叠氮化钠可抑制微生物生长。若用于细胞培养或活细胞实验需通过透析或脱盐柱去除。稳定剂0.1% BSA降低非特异性吸附及管壁损耗。有效期自到货之日起1年。建议分装成单次使用量储存于2–8°C避免反复开管。总结A301-254A是一款针对人FANCI蛋白C端区域1025–1075 aa的亲和纯化兔多抗专门优化了IP6 µg/mg裂解物和WB1:2000–1:10000应用。其高特异性经抗原亲和纯化保障适合研究范可尼贫血通路中FANCI-FANCD2复合物的组装、泛素化激活及DNA损伤修复功能。在IP-WB实验中建议搭配轻链特异性二抗以避免信号干扰。该抗体为FA通路机制研究、DNA交联修复及癌症耐药性分析提供了可靠的工具。